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精准高效,轻松上手!ELISA试剂盒操作全攻略,助您实验事半功倍

发布时间:2025-04-07 10:27 |  点击次数:2411

精准高效,轻松上手!ELISA试剂盒操作全攻略,助您实验事半功倍

ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学检测方法,因其高灵敏度、特异性强和操作便捷等特点,成为检测目标蛋白、抗体或生物标志物的黄金标准 但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。

操作小贴士:细节决定成败
加样
  标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10, 放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8冰箱中,若要贮存,则置于-20的低温冰箱内。                                           

o 加样后及时放入孵箱。

 o 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

  o 如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

孵育
孵育时贴封片或加盖;避免标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底。 

严格控制温育时间:使用计时器提醒,防止反应过度或不足。

洗板

  保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干。

显色
  显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;加样时保持显色剂不外流。 

  o 显色液应避免接触金属器械。

终止
  加终止液时应避免产生气泡

读板
  o应保证酶标板清洁,.整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸


三步掌握核心操作,新手也能快速上手

上海西唐生物ELISA试剂盒采用预包被板条和即用型试剂,优化传统繁琐流程,仅需三步即可完成实验:

1.    样本与标准品准备

o    样本处理:血清、血浆或细胞上清液需离心去除杂质,按说明书稀释至合适浓度,避免反复冻融。

o    标准品梯度稀释:试剂盒提供预混标准品,只需按比例稀释即可生成标准曲线,节省配制时间。

2.    加样与孵育

o    精准加样:使用多通道移液器向预包被孔中依次加入标准品、待测样本和空白对照。

o    37避光孵育:缩短反应时间至1小时,搭配振荡功能(建议300rpm)提升抗原抗体结合效率。

3.    洗涤-显色-终止

o    自动化洗涤:试剂盒配备专用洗涤缓冲液和洗板机程序,彻底去除游离物质,避免假阳性。

o    TMB显色:加入显色底物后室温避光反应15分钟,溶液变蓝立即终止,精准控制显色时间。


四大优势,解决您的实验痛点

1.    灵敏度高,线性范围广
抗体的性能直接决定了试剂盒的特异性。适合的抗体特异性、亲和力、敏感度等指标能够精准地识别目标抗原,避免与其他非目标抗原发生交叉反应。上海西唐生物选用高特异性和高亲和力的抗体确保试剂盒灵敏度、特异性和准确性。采用高亲和力抗体,检测下限低至1pg/mL,标准曲线≥0.99,确保低浓度样本精准检出。

2.    批间差<10%,数据可靠
严格质控的生产工艺配合即用型试剂,减少人为操作误差,实验结果重复性优异。

3.    稳定性和重复性
ELISA试剂盒中各种缓冲液的配伍和稳定性对试剂盒的性能影响巨大。上海西唐生物优化完善配方体系,操作时间更短共1.5小时,通过严格的配伍实验,确保试剂盒中各种试剂的稳定性和兼容性,保证试剂盒的长期稳定性和重复性。

4.    适应多样本类型
经多重验证,适用于血清、组织裂解液、细胞培养液等多种复杂样本,抗干扰能力强。

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